Исследователи из Бирмингемского университета изобрели тест на COVID-19, который сокращает время тестирования с 30 минут до пяти и дает точные результаты.
Этот метод описан в препринте (еще не прошедшем рецензирование), опубликованном на MedRxiv, где исследователи также демонстрируют быстроту и чувствительность своего метода с использованием РНК образца пациента, предоставленной Общественным здравоохранением Англии.
Профессор Тим Даффорн из Школы биологических наук Университета прокомментировал: «Мы разработали новый метод тестирования, который сочетает в себе простоту использования и скорость тестирования бокового потока с присущей ему чувствительностью РНК- теста . Он включает реагенты, которые можно использовать в существующих в местах оказания медицинской помощи и удовлетворяет потребность в тестировании в условиях высокой пропускной способности, в непосредственной близости от пациента, где люди могут стоять в очереди за результатами ».
Текущий золотой стандарт — это тест полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Это занимает более часа на образец и состоит из двух этапов. Первый, который занимает 30 минут, использует фермент обратной транскриптазы для преобразования РНК в ДНК. Во втором случае используется фермент ДНК-полимераза для копирования ДНК и ее амплификации до обнаруживаемых уровней, и для этого требуются длительные циклы нагрева и охлаждения. Хотя в этом году были разработаны процессы с одной температурой, сокращение этого шага ниже 20 минут оказалось сложной задачей. Тесты с боковым потоком, которые определяют наличие антител, могут длиться до 30 минут.
Исследователи создали новый одноэтапный подход для преобразования вирусной РНК в ДНК и объединили его с известной техникой под названием «Экспоненциальная реакция амплификации» (EXPAR), которая увеличивает концентрацию ДНК до обнаруживаемых уровней при постоянной температуре. Они называют новый метод тестирования EXPAR без обратной транскриптазы (RTF-EXPAR).
University of Birmingham Enterprise подал заявку на патент, охватывающий метод и его использование в диагностическом оборудовании, и теперь пытается получить лицензию на патент для быстрой разработки продукта.
В этом методе используется последовательность ДНК (называемая связывающей ДНК), которая распознает и связывается с вирусной РНК SARS-CoV-2 и ферментом (BstNI), который распознает связывающую ДНК, и вырезает из нее короткий участок, когда присутствует вирусная РНК. Как только это расщепление произошло, вирусная РНК может свободно связываться с большим количеством связывающей ДНК, и цикл повторяется. Тест определяет результат этого цикла.
Исследователи протестировали метод, добавив образцы BstNI, Binder DNA и SARS-CoV-2 в реагенты EXPAR и инкубируя при постоянной температуре 50 ° C. Эти условия дали результаты теста за 4,00 +/- 0,72 минуты для положительного образца. Сигнал для отрицательного (контрольного) образца не наблюдался после 10 минут инкубации. Концентрация РНК SARS-CoV-2 в положительном образце составила 72,7 копий / мкл, что в десять раз ниже, чем средняя вирусная нагрузка, обнаруженная в образцах пациентов с COVID-19.
Загрузка...
